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HEPES缓冲液-细胞培养中的战斗机
发布日期[2023/06/12]

HEPES溶液是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸,是一种有机化工中的两性离子缓冲剂。该物质的分解能力可随温度的升高而增强,随温度的降低而减弱,但与其他缓冲剂相比,它的分解常数随温度变化不大,这使HEPES缓冲液成为在低温时可较好地保持酶的结构和功能的缓冲剂。

HEPES缓冲剂能较长时间控制恒定的pH范围,对细胞无毒性作用,常用于细胞培养。为了改善BHK一21细胞的培养环境,保持口蹄疫病毒146S抗原的稳定性,提高疫苗内完整病毒颗粒的含量,有专家进行了培养液缓冲系统的研究。在研究中,进行了添加HEPES对病毒抗原稳定性比较试验,评价其保护效果。

根据实验结果表明,用生物缓冲剂HEPES培养的病毒液毒价高于不用生物缓冲剂的病毒液。在37℃条件下,不含生物缓冲剂的病毒液TCID50(半数组织培养感染剂量)变化的幅度比含生物缓冲剂的病毒液大,不过需要注意的是:当HEPES暴露于光线中时,会产生过氧化氢,这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性,因此HEPES作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。

因此可知,生物缓冲剂可以有效地改善病毒培养液缓冲能力,给病毒提供一个适宜的环境,促进病毒颗粒的稳定性。

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